技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 懸浮細胞做好免疫熒光的方法Protocol和創新

懸浮細胞做好免疫熒光的方法Protocol和創新

發布時間:2022-12-18   點擊次數:244次

根據細胞培養時是否附著在支持介質上,分為貼壁細胞懸浮細胞。

貼壁細胞天生容易貼壁,這為后續實驗提供了便利條件。

但是懸浮細胞在培養基中懸浮生長,如何像貼壁細胞一樣好操作,一直是大家的夢想。


一 傳統的方法:細胞準備與固定

(1)單層生長細胞:取對數生長細胞,用0.25%胰
蛋白酶消化,制成單細胞懸液。將細胞接種到預先放置幾張6×22mm蓋玻片的培養瓶或培養皿中,置二氧化碳培養箱培養1-3天,待細胞接近長成單層,取出蓋玻片,進入PBS(0.01 mol/L,pH7.4)洗2次,然后根據實驗目的,選擇適當固定劑固定細胞。常用固定劑有:95%乙醇(固定時間10-30min),丙酮(5-10min)等。

(2) 懸浮生長細胞:取對數生長細胞,用PBS離心洗滌(1000rpm,5min)2次,或用細胞離心甩片機制備細胞片或直接制備細胞涂片,把細胞片浸入95%乙醇或丙酮中固定。

2 將已經固定的細胞玻片放入蓋片染色缸,用PBS振洗5min,取出吹干。

3 滴加適當稀釋的特異性
抗體,置于濕盒內,37度保溫30-60min或度冰箱過夜

4 PBS振洗3次,每次5min,吹干。

5 滴加適當稀釋的熒光素標記抗體,置于濕盒內,37度保溫30-60min。

6 PBS振洗2次,每次5min,然后用蒸餾水振洗1次。

7 50%緩沖甘油封片。


二 Shi-Fix玻片最新方法


Shi-Fix玻片,可以讓我們像貼壁細胞一樣對懸浮細胞做免疫熒光,如下是使用Shi-Fix做的實驗結果。簡單的四部,告別傳統的自己涂片,自己甩片,自己烤片等作坊式方法。



靶點科技(北京)有限公司

靶點科技(北京)有限公司

地址:中關村生命科學園北清創意園2-4樓2層

© 2023 版權所有:靶點科技(北京)有限公司  備案號:京ICP備18027329號-2  總訪問量:124285  站點地圖  技術支持:化工儀器網  管理登陸

QQ在線客服
聯系方式

15210359867

4000043669

中国人免费的视频大全,美女裸体无遮挡黄污网站,一级A片欧美日本俄罗斯国产-国产特黄一级AAA片在线视频-国产一级欧美一级人体,超碰最新网址在线 <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链>